1.本发明涉及中药领域，具体地说，涉及一种治疗肝癌恶病质的中药组合物及其应用。


背景技术：

2.恶病质是导致癌症患者死亡的主要的原因之一，根据国际临床流行病学研究显示，大约40％-80％的癌症患者晚期会出现恶病质，从而导致患者的死亡。出现恶病质的患者，临床上主要表现为体质量进行性下降。而肝癌患者容易发生恶病质，其主要原因是肝癌细胞易于分泌多种炎症因子，且这些炎症因子大量释放入血。同时肝脏是机体代谢的调节中心器官。目前临床上用于癌症治疗的主要手段包括化疗、放疗、以及靶向药物应用等手段，通过抑制或者杀死癌细胞，试图达到延缓患者病情进展，延长患者生存期间的目的。然而，这些手段并不能有效地延缓恶病质的出现。
3.癌症恶病质常伴有厌食，相比于西药，中医药在治疗癌性厌食方面具有整体调节、副作用少、疗效确切的优势。中医学中没有癌症恶病质的病名，但有许多症状的描述与恶病质相似，《素问
·
玉机真藏论》有“大骨枯槁，大肉陷下，胸中气满，喘息不便，其气动形，期六月死”所述病状与晚期肝癌合并恶病质非常相似。中医认为癌症恶病质病机病因：虚中夹实，是全身的气血不足及脏腑功能底下及局部肿瘤的实邪并存，其主要核心病机之一为后天气血生化功能严重衰退，补益后天生化之源是治疗本病的重要治则之一，久病及肾，脾肾亏虚也是该病的重要病机。临床上针对癌症恶病质厌食症状，主要以益气养阴、运脾健胃消食和补益脾胃等为主要治则，兼用理气或活血化瘀等往往能起到更好的临床效果。癌症恶病质如何补益促进康复，而“虚不受补”是临床治疗的瓶颈。
4.本技术人之前的另一件专利cn102772732a公开了一种治疗慢性肝病的药物组合物，所述的药物组合物由以下重量份的原料药制成：猕猴桃汁20-60份、丹参10-30份、白术5-15份、淫羊藿4-12份、茯苓4-12份、柴胡2-6份、五味子5-15份、白寇1.5-4.5份、陈皮2.5-7.5份、太子参5-15份，但其制备工艺及药物用途均与本发明不同，本发明在此基础上减少了药味，并且药物是针对肝癌恶病质，药物用途是上述专利所未公开和不具备的。同时，本发明人所在课题组以本技术中的药物组合物为基础制成的护肝方919颗粒，该方为临床个人经验结合民间验方组成的中药复方制剂。经过30多年的临床与基础研究证实有确切的护肝降酶、抗乙型肝炎病毒、抗肝脂肪变性、抗肝纤维化作用。根据中医八法中补消两法，护肝方919颗粒的配伍寓补于消，活血理气的同时，达到补益的功效，能改善癌症恶病质患者的纳差与乏力，且无毒副作用。该方的组方恰好吻合了肝癌恶病质治疗的难点“虚不受补”，认为该方治疗肝癌恶病质状态有广阔的临床应用前景。
5.目前尚未有关于本发明用于治疗肝癌恶病质的报道。


技术实现要素：

6.本发明的第一个目的是，针对现有技术中的不足，提供一种治疗肝癌恶病质的中
药组合物。
7.本发明的第二个目的是，提供一种治疗肝癌恶病质的药物组合物的用途。
8.为实现上述第一个目的，本发明采取的技术方案是：
9.一种治疗治疗肝癌恶病质的中药组合物，所述中药组合物由以下重量份的原料药制成：
10.猕猴桃汁16-24份、丹参6-14份、白术3-7份、淫羊藿2-6份、茯苓2-6份、柴胡1-4份、五味子3-7份、太子参3-7份。
11.作为一个优选例，所述中药组合物由以下重量份配比的原料药制成：
12.猕猴桃汁18-22份、丹参8-12份、白术4-6份、淫羊藿3-5份、茯苓3-5份、柴胡1-3份、五味子4-6份、太子参4-6份。
13.更优选地，所述中药组合物由以下重量份配比的原料药制成：
14.猕猴桃汁20份、丹参10份、白术5份、淫羊藿4份、茯苓4份、柴胡2份、五味子5份、太子参5份。
15.所述的药物组合物的制备方法包括以下步骤：
16.(a)将五味子、柴胡、白术三味药放入蒸馏锅内，加三倍重量的水进行蒸馏，取蒸馏挥发油溶液，另器密封保存备用；
17.(b)继将蒸馏后的药渣加水，煎煮一小时，静置十小时后过滤取汁，收装待浓缩；
18.(c)丹参、太子参、淫羊藿、茯苓、四味药放入煎煮锅内，加水煮两次，保持沸腾一小时后，待自然冷却再过滤取汁，合并两次煎液，静置六小时后再过滤取汁，收装待混合制作；
19.(d)将步骤(b)与步骤(c)获得的过滤液混合采取低温减压浓缩法，浓缩至比重为1：1，滤液与猕猴桃汁20/10，加入步骤(a)的挥发油溶液及蒸馏水混合，充分搅拌至稠浸膏，然后制粒，干燥，整粒。
20.作为一个优选例，所述的中药组合物的剂型为颗粒。
21.为实现上述的第二个目的，本发明采取的技术方案是：
22.如上任一所述的中药组合物在制备治疗肝癌恶病质药物中的应用。
23.本发明中药组合物的配伍关系：
24.方中以猕猴桃为君药，《本草纲目》谓其“酸甘寒无毒，入肝脾肾心肺经，止暴渴，解烦热......调中下气”，可养阴清热。根据“见肝之病，知肝传脾，当先实脾”的中医理论，以太子参、白术、茯苓、健脾和胃为臣药，肝脾久病累及肾之阴阳，以淫羊藿燮理阴阳为佐助药，肝脏体阴而用阳，用丹参一味抵四物汤，补血而活血，也为佐助药，全方以柴胡、五味子一散一敛，为引经使药。本方融养肝、健脾、滋肾、和胃、理气、活血等法于一炉，组成复方。
具体实施方式
25.下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明记载的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本技术所附权利要求书所限定的范围。
26.实施例1药物组合物(一)
27.猕猴桃汁20份、丹参10份、白术5份、淫羊藿4份、茯苓4份、柴胡2份、五味子5份、太
子参5份。
28.实施例2药物组合物(二)
29.猕猴桃汁20份、丹参8份、白术6份、淫羊藿2份、茯苓6份、柴胡2份、五味子4份、太子参6份。
30.实施例3药物组合物(三)
31.猕猴桃汁18份、丹参12份、白术3份、淫羊藿6份、茯苓4份、柴胡1份、五味子6份、太子参3份。
32.实施例4药物组合物(四)
33.猕猴桃汁22份、丹参6份、白术7份、淫羊藿4份、茯苓3份、柴胡3份、五味子3份、太子参7份。
34.实施例5物组合物(五)
35.猕猴桃汁16份、丹参14份、白术5份、淫羊藿3份、茯苓5份、柴胡1份、五味子7份、太子参5份。
36.实施例6药物组合物(六)
37.猕猴桃汁24份、丹参10份、白术4份、淫羊藿5份、茯苓2份、柴胡4份、五味子5份、太子参4份。
38.实施例7治疗肝癌恶病质药物组合物(七)
39.猕猴桃汁20份、丹参12份、白术3份、淫羊藿6份、茯苓4份、柴胡1份、五味子6份、太子参3份。
40.实施例8药物组合物(八)
41.猕猴桃汁18份、丹参6份、白术7份、淫羊藿4份、茯苓3份、柴胡3份、五味子3份、太子参7份。
42.实施例9药物组合物(九)
43.猕猴桃汁22份、丹参14份、白术5份、淫羊藿3份、茯苓5份、柴胡1份、五味子7份、太子参5份。
44.实施例10药物组合物(十)
45.猕猴桃汁16份、丹参10份、白术4份、淫羊藿5份、茯苓2份、柴胡4份、五味子5份、太子参4份。
46.实施例11药物组合物(十一)
47.猕猴桃汁24份、丹参8份、白术6份、淫羊藿2份、茯苓2份、柴胡2份、五味子4份、太子参6份。
48.实施例12药物组合物的制备
49.(a)将五味子、柴胡、白术三味药放入蒸馏锅内，加三倍重量的水进行蒸馏，取蒸馏挥发油溶液，另器密封保存备用。继将蒸馏后的药渣加水，煎煮一小时，静置十小时后过滤取汁，收装待浓缩。
50.(b)将丹参、太子参、淫羊藿、茯苓、四味药放入煎煮锅内，加水煮两次，保持沸腾一小时后，待自然冷却再过滤取汁，合并两次煎液，静置六小时后再过滤取汁，收装待混合制作。
51.(c)将步骤(b)与步骤(c)获得的过滤液混合采取低温减压浓缩法，浓缩至比重为
1：1，滤液与猕猴桃汁20/10，加入步骤(a)的挥发油溶液及蒸馏水混合，充分搅拌至稠浸膏，然后制粒，干燥，整粒。
52.实施例13动物实验
53.1材料
54.1.1实验动物
55.于上海吉辉实验动物饲养有限公司[scxk(沪)2017-0012]购入7周龄的雌雄balb/c小鼠90只，体重18-28g，安置于上海市公共卫生临床中心动物房(spf级)。每5只小鼠为一笼，圈养在铺有木屑的的塑料鼠笼(300
×
200
×
120mm)中。房间保持在恒温(23
±
3℃)、恒湿(50％
±
10％)、照明12小时(8:00-20:00)的标准条件下。除束缚时间外，所有小鼠在整个实验过程中均可自由获得无菌食物和水。
[0056]
1.2仪器与试剂
[0057]
1.2.1试剂
[0058]
盐酸普萘洛尔(常州亚邦制药有限公司，含量：99.4％)；9.4％胎牛血清(fbs)，胰酶，青链霉素(美国gibco公司)；改良型rpmi 1640培养液(美国hyclone公司)；考马斯蛋白测定试剂盒、血浆肌酸激酶(ck)测试试剂盒(南京建成生物工程研究所)；促炎因子白细胞介素-1β(1l-β)，白细胞介素-6(1l-6)，肿瘤坏死因子-α(tnf-α)酶联免疫吸附试验(elisa)试剂盒(上海依科赛生物制品有限公司)。
[0059]
1.2.2仪器
[0060]
eclipse ties型倒置显微镜(日本尼康公司)；sunrise型酶标仪(瑞士tecan公司)；au2700型全自动生化分析仪(美国beckman coulter公司)；cm 3050型冰冻切片机(德国leica公司)；galaxy171r型细胞培养箱，5430r型台式低温离心机(德国eppendorf公司)。
[0061]
2实验方案
[0062]
2.1动物造模
[0063]
将肝癌细胞系hepg2复苏，用细胞培养基中(改良型rpmi 1640培养液，10％fbs，100mg/l-链霉素和1/105u/l-青霉素)调整密度为1
×
105个/ml，接种于100mm培养皿中，置于37℃5％co2培养箱中培养。待细胞长满整个培养皿时，加入0.05％胰酶消化后，收集细胞，用生理盐水配成1
×
107个/ml，注入60只balb/c近交系小鼠右前肢腋下的皮下区域，然后继续饲养小鼠。饲养4周后，选择有肿瘤生长的动物，麻醉消毒后，取出长出的肿瘤组织。4℃条件下，将肿瘤剪成1.0mm3耐左右的组织小块。用0.01％磷酸盐缓冲溶液(pbs)将组织小块清洗干净后，重新植入到balb/c近交系小鼠右前肢腋下。待小鼠明显消瘦，出现厌食、虚弱、衰竭，体质量下降至与正常组有显著性差异时，即进入恶病质状态，说明模型制备成功。28d后，待肿瘤外观长大，并且小鼠体质量开始下降时，开始分组给药。
[0064]
2.2分组与给药
[0065]
将上述造模成功的小鼠随机选取60只分成6组，每组10只，雌雄各半，分别为本发明组一、本发明组二、对照组一、对照组二、模型组、西药组，再从未造模小鼠中选取10只作为空白组，按以下方式连续给药10天：
[0066]
本发明组一：按照实施例1所述的重量份秤取各原料药，按照实施例12制备药物，每日灌服颗粒药物溶液(蒸馏水溶解，1.5g/ml)20ml/kg。
[0067]
本发明组二：按照实施例2所述的重量份秤取各原料药，按照实施例12制备药物，
每日灌服颗粒药物溶液(蒸馏水溶解，1.5g/ml)20ml/kg。
[0068]
对照组一：按重量份配比称取猕猴桃汁20份、丹参10份、白术5份、淫羊藿4份、茯苓4份、柴胡2份、五味子5份、白寇1.5份、陈皮2.5份、太子参5份，按实施例12制备药物，每日灌服颗粒药物溶液(蒸馏水溶解，1.5g/ml)20ml/kg。
[0069]
对照组二：按重量份配比称取猕猴桃汁20份、丹参10份、白术5份、淫羊藿4份、茯苓4份、柴胡2份、乌梅5份、西洋参5份。按实施例12制备药物，每日灌服颗粒药物溶液(蒸馏水溶解，1.5g/ml)20ml/kg。
[0070]
西药组：每天按3mg/kg灌服普萘洛尔。
[0071]
模型组：每天按20ml/kg生理盐水灌胃。
[0072]
空白组：每天按20ml/kg生理盐水灌胃。
[0073]
2.3检测指标
[0074]
2.3.1小鼠体质量的评估
[0075]
测定小鼠造模后的体质量，准确反映小鼠恶病质下的状态。
[0076]
2.3.2 elisa检测小鼠血浆ck及促炎因子的水平
[0077]
将各组小鼠用戊巴比妥钠麻醉(40mg/kg)，腹主动脉取血，肝素抗凝，3000r/min离心10min将上清血浆移到新的1.5ml的离心管中，置于-20℃存储备测。采用elisa试剂盒，按说明书分别测定ck及1l-1β，1l-6，tnf-α的水平。
[0078]
3统计学分析
[0079]
数据处理采用spss 23.0统计软件，实验结果以平均数
±
标准误(x
±
sem)表示不同组间的差异比较采用one-wayanovawith t-test进行统计学分析，以p《0.05为差异有统计学意义。
[0080]
4结果
[0081]
4.1对肝癌恶病质小鼠体质量的影响
[0082]
与空白组比较，恶病质模型组小鼠体质量显著降低(p《0.001)；与模型组比较，本发明组、西药组对照组均能够明显延缓肝癌恶病质小鼠体质量下降的作用(p《0.05)；其中本发明一和本发明组二的效果都优于对照组一和对照组二(p《0.05)；本发明组一与西药组并无显著差异，见表1。
[0083]
表1中药组合物对肝癌恶病质小鼠体质量的影响(n＝70)
[0084]
组别n(例)体质量/g本发明组一1024.19
±
1.96
2,3)
本发明组二1023.09
±
2.55
2,3)
对照组一1022.39
±
1.881
2)
对照组二1022.61
±
1.89
2)
西药组1024.08
±
2.10
2)
模型组1021.95
±
2.19
1)
空白组1025.51
±
1.14
[0085]
注：与空白组比较
1)
(p《0.001)；与模型组比较
2)
(p《0.05)；与对照组比较
3)
(p《0.05)
[0086]
4.2对小鼠骨骼肌分解代谢产物血浆ck的水平的影响
[0087]
与空白组比较，恶病质模型组血浆肌酸激酶水平显著增高(p《0.01)；与模型组比较，本发明组、西药组和对照组血浆肌酸激酶水平显著下降(p《0.05)；相比于对照组，本发明组血肌酸激酶水平进一步下降(p《0.01)，提示肌肉降解程度明显减弱；而本发明组一的抑制水平显著强于本发明组二(p《0.05)；本发明一的抑制水平与西药组无显著差异，见表2。
[0088]
表2中药组合物对恶病质小鼠血浆中肌酸激酶的水平的影响(n＝70)
[0089]
组别n(例)ck/ul-1
本发明组一1069.31
±
12.28
2,3,4)
本发明组二1075.73
±
11.05
2.3)
对照组一1087.12
±
9.66
2)
对照组二1083.55
±
14.14
2)
西药组1072.31
±
11.30
2)
模型组10137.29
±
21.42
1)
空白组1066.21
±
11.72
[0090]
注：与空白组比较
1)
(p《0.01)；与模型组比较
2)
(p《0.05)；与对照组比较
3)
(p《0.01)；与本发明组二比较
4)
(p《0.05)
[0091]
4.3中药组合物对恶病质小鼠血浆中1l-1β，1l-6，tnf-α分泌水平的抑制作用
[0092]
与空白组比较，恶病质模型组小鼠血浆中1l-1β，1l-6，tnf-α水平显著增高(p《0.001)；与模型组比较，本发明组、西药组和对照组的1l-1β，1l-6，tnf-α水平显著下降(p《0.05)；与对照组相比，本发明组具有显著抑制作用(p《0.05)；其中本发明组一的1l-1β的水平显著低于西药组(p《0.05)；本发明显著低于对照组(p《0.05)、(p《0.01)；其中本发明组一的1l-6显著低于西药组和本发明组二(p《0.05)；并且本发明组一的tnf-α显著低于本发明组二(p《0.05)，见表3。
[0093]
表3中药组合物对恶病质小鼠血浆中1l-1β，1l-6，tnf-α水平的影响(n＝70)
[0094]
组别n(例)1l-1β1l-6tnf-α本发明组一1066.43
±
17.28
2,3,5)
618.92
±
128.59
2,4,5,6)
644.18
±
144.04
2,3,6)
本发明组二1072.41
±
12.42
2,3)
738.88
±
47.04
2,3)
748.18
±
93.09
2,3)
对照组一1084.51
±
10.15
2)
845.99
±
86.45
2)
849.84
±
104.73
2)
对照组二1081.87
±
13.54
2)
822.67
±
130.13
2)
843.70
±
192.10
2)
西药组1079.88
±
9.44
2)
760.89
±
115.63
2)
700.53
±
87.08
2)
模型组10107.89
±
15.93
1)
1007.24
±
193.86
1)
979.28
±
133.70
1)
空白组1055.21
±
11.85548.93
±
81.97494.18
±
93.04
[0095]
注：与空白组比较
1)
(p《0.001)；与模型组比较
2)
(p《0.05)；与对照组比较
3)
(p《0.05)，
4)
p《0.001)；与西药组比较
5)
(p《0.05)；与本发明组二比较
6)
(p《0.05)
[0096]
综上所述，使用本发明、西药组和对照组的药物都能不同程度地抑制人类肝癌细胞系hep g2诱导的小鼠恶病质模型的恶病质的进程，本发明组的药物抑制作用效果优于对照组，总体而言本发明组一的效果最为突出。
[0097]
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为
本发明的保护范围。